压力蒸汽灭菌的生物监测法是利用嗜热脂肪杆菌芽孢的活菌对灭菌效能进行监测, 它能及时有效反映物品的灭菌质量, 保证了临床使用的安全性。现将我院生物监测的干湿式恒温箱培养介绍如下。
1 材料与方法
1. 1 材料
生物指示剂嗜热脂肪杆菌( ATCC7953 )芽孢, 北京四环卫生药械厂生产, 含菌量5 x105 ~ 5x106 c fu /片(自含式),配备专用的56℃培养箱干湿式各1台, 分别由上海精宏实验设备有限公司生产的电热恒温水浴箱和上海博迅实业有限公司生产的隔水式电热恒温培养箱。
1. 2 方法
将每组2支生物指示剂管置于标准试验包中心部位。试验包分别放置于LDZM-60KCS智能型带干燥功能压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂生产）内上层前部, 中层中部, 下层后部(排气口上方),灭菌器装载量达90%, 采用的运行程序, 内室蒸汽压为0.21~0.22MPa内室温度为132℃~134℃。灭菌8min,干燥10min。连续监测34周次,每周1次。灭菌结束即刻将生物指示剂管取出, 盖面朝上垂直握于手中用镊子夹住指示管下端尖部, 将管内瓿夹碎,让培养液流出浸没菌片,充分振摇, 然后分别放置于干湿式的培养箱内培养48h, 同时放置1支未经灭菌程序处理的生物指示剂管作阳性对照, 管内培养液由紫色变为黄色, 即表示有菌生长, 判断灭菌不合格, 如仍为紫色即表示无菌生长。同时阳性对照生长正常判断灭菌合格。
2 结果
连续生物监测34次中, 干燥室培养灭菌合格34次, 合格率为100%, 而湿式培养箱培养灭菌合格22次, 合格率75%。
3 讨论
必须选择同批号的生物指示剂作为对照, 且对照管必须为阳性, 如果对照管出现阴性, 其原因可能是菌片上微生物本已死亡或培养基已失效或培养温度不符合要求。干燥室培养箱恒温效果好, 生物指示剂盖面上的三个小孔不宜受到污染而出现假阳性结果, 而湿式水浴恒温培养箱在56度时仍有部分的热水汽通过指示剂盖面上的三个小孔进入而引起培养基污染而出现阳性结果, 从而影响生物监测的准确判断。任何生物指示剂呈阳性结果时,均应认为是灭菌失败。出现阳性结果时应采取相应的措施,要将所有物品收回重新处理;检查灭菌过程的各个方面(灭菌器, 装载过程和包装技术等),找出灭菌失败的可能原因;用几个生物指示剂重新测试灭菌器的工作状态; 在生物指示剂结果都是阴性前不要使用该灭菌器;另外还要考虑生物指示剂本身是否符合质量要求及培养坏境等情况。根据医院消毒供应中心管理规范每周必须对灭菌器做次生物监测, 是控制消毒灭菌质量的有效可靠的方法,有利于及时发现灭菌过程中的新问题, 并及时解决, 保证了医院灭菌物品供应的高质量。
